在二战期间，希特勒在世界各地招募考古学家来搜寻失落的约柜，这是圣经中一个可以引导希伯来人与上帝交流的圣物，他希望用它来保护纳粹的战争。为了阻止希特勒的计划，印第安纳琼斯博士前往尼泊尔，奋力挖掘线索，同时还要与难缠的纳粹分子斗争。凭借着过人的智慧、勇气和胆识，琼斯最终在罗马找到了指向约柜位置的太阳手杖，并成功找到了约柜。然而，就在取得胜利之际，纳粹士兵却夺走了探险队的成果，还把琼斯等人留在了险恶的蛇穴里！但无敌的琼斯总有逃脱的方法，并成功地还以颜色！